技术结合了滚动循环放大和time-gated福斯特检测癌症微共振能量转移

数字3 d说明人体的癌细胞

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的时候可能会替换当前黄金标准方法检测癌症患者样本中的微。法国科学家已经开发出一种方法更简单,更精确的比RT-qPCR(逆转录定量聚合连锁反应),可以开发,医生在诊所使用。

开发的方法妮可Hildebrandt因为大学和他的同事们,采用time-gated福斯特共振能量转移(TG-FRET),在此期间之间的能量转移两个相互靠近的荧光染料。能量是只有当一个特定的疾病标记存在转移,导致荧光反应。提高方法的灵敏度,希尔德布朗特团队耦合TG-FRET放大过程称为滚动循环放大。“这意味着我们有检测的能量转移,和给我们更多的信号放大。这两个在一起让我们有非常低的检测极限和一个简单的分析,我们可以做临床仪器板上已经存在在一些诊所和手段(这种技术)将直接适用于病人,“妮可解释道。

放大TG-FRET microrna的检测原理

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经过线性挂锁microrna的特定识别DNA (1), DNA挂锁尼克夹板结扎在microrna的目标使用SplintR连接酶(2)和microrna成为phi29聚合酶合成引物和取代互补DNA卷曲挂锁DNA(3)。停止滚动循环放大(RCA)后,滚动圆产品(RCP)孵化与结核病供体和Cy5.5受体标记ssDNA,杂交特定序列存在超过1000倍放大RCP多联体。Lumi4-Tb的近距离和Cy5.5 RCP允许Tb-to-Cy5.5苦恼,这是不可能的如果都是免费的解决方案。因此,TG-FRET信号可用于量化microrna的没有任何洗涤和分离步骤

尽可能早地发现癌症给病人生存的最好机会。这项技术将为临床医生提供癌症信息类型和阶段显著比当前流程更好的敏感性和特异性。集团在实际组织和血浆样本,测试了他们的技术,表明比金本位RT-qPCR, 62%的样本被发现癌症生物标记物超过健康水平,相比使用RT-qPCR时只有17%。

Allison丹尼斯专家担心,波士顿大学生物医学工程,希尔德布朗特说,我们组是一个领导者在lanthanide-based时间分辨烦恼。他们使漂亮的光物理演示苦恼之外,和专注于现实世界的应用。“讨论该方法的简单性和适用性,丹尼斯指出,该集团设法减轻副反应中发现临床化验。从应用程序的角度看,你不需要使用前清洁样品…这是一个巨大的进步,这有助于使事情更准确和可靠的。

该集团想要推动通过与更多的病人进行更多的临床研究。他们也希望将技术与癌症微rna在细胞荧光成像技术来定位。