精确的核酸水平与癌症可以被肉眼发现
微RNA (microrna的)短长度的RNA和一些癌症细胞释放进入血液,在那里他们被认为有助于转移。特定的microrna指纹可以作为特定的癌症。Attomolar (10-18年米)的浓度可以通过qPCR临床检测和量化,RNA酶放大在一系列的重复加热和冷却的循环,和产品检测实时RNA放大。然而,这种方法有几个缺点,尤其是选择性放大的一个序列相对于另一个可能导致假阳性。
在南京东南大学的科学家,中国,和他的同事们在中国和美国发明了一种新技术检测microrna使用转基因T7噬菌体——一个只攻击细菌的病毒类型——绿色荧光蛋白质一端和gold-binding蛋白质。然后添加这些噬菌体金纳米粒子溶液(国民生产总值)标记的寡核苷酸结合一个叫做let-7a microrna的一端——非小细胞肺癌的生物标志物。另外,研究者functionalised磁性微粒(基质金属蛋白酶),数百份一个寡核苷酸序列,结合这个microrna的另一端。然后他们孵化phage-labelled国民生产总值和基质金属蛋白酶在包含癌症microrna的解决方案。
如果癌症生物标志物在场,噬菌体标记国民生产总值和基质金属蛋白酶绑定microrna的两端,导致let-7a充当胶水,粘数百每个MMP的国民生产总值。如果特定的microrna的不是两个粒子没有关联。研究人员然后磁分离的基质金属蛋白酶解,连同任何国民生产总值。最后,噬菌体被释放从国民生产总值和宿主细菌培养基培养。
点计数
每个荧光噬菌体病毒繁殖的细菌中,形成一个单独的斑块。三个小时后,斑块是用肉眼通过照亮用紫外线和计数绿色斑点。每个噬菌体呈现在示例与前一个示例解决方案中microrna的分离,因此,研究人员可以使用病毒斑块的数量在主机中计算浓度的microrna attomolar精度。此外,当没有microrna的团队进行了控制实验,没有发现斑块在主机细菌培养基。研究人员说,这证明了,不像在qPCR的案例中,他们的新测试并没有误报的风险。
研究人员还声称,这项技术更容易也更便宜比qPCR:“对于这个技术,我们不需要专门的设备,与qPCR不同,“生物化学家说Chuanbin毛俄克拉荷马大学和浙江大学。毛说,传统qPCR成本约为120美元(£77)运行一个示例,而他的技术只会花费30美元。进一步的测试表明,该技术可以用来测试多个microrna在同一样品在真正的组织样本,也是有效的。
Bio-analytical化学家格雷戈里·韦斯加州大学欧文分校的印象:“他们想出一些真正的创新使用病毒建立检测方案,”他说。他怀疑,然而,研究人员声称,这项技术将会更容易,更便宜或qPCR一样快。这里的专家有很多步骤涉及磁珠捕获,以及如何执行这些步骤使结果不同。关于成本,他说:“我们所做的一些东西与金纳米粒子和磁性微粒,这些该死的昂贵,而[qPCR]中使用的试剂是商品项目在实验室里。尽管如此,他说,qPCR顺序相依,有时只是不接序列,所以我认为有一定时候,这将是有用的。
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